紫外分析儀的原理及校準的重要性
紫外分析儀采用不同波長的紫外光對DNA、RNA電泳凝膠樣品進行觀察拍照、檢測蛋白質、核甘酸,也可以同時發出長波紫外線、短波紫外線和可見光三種波長的光輻射。紫外分析儀適用于核酸電泳、熒光的分析、檢測,PCR產物檢測,DNA指紋圖譜分析,紙層分析,薄層分析,是開展RFLP研究,RAPD產物分析的理想儀器。
工作原理:
普通處于基態的物質分子受到激發光(即紫外線)照射后,吸收了激發的能量,物質分子處于激發狀態。激發態分子的能量一部分消耗于振動,于是分子處于振動能級,從振動能級回到基態時多余的能量依其它的形式放出來即為熒光,而不同物質能發出不同波長的熒光,人們可以根據不同光色的熒光和熒光的強弱來判斷不同的物質和含量多少,這就是熒光分析。
紫外分析儀校準的重要性:
1、根據調查統計,絕大多數廠商生產的紫外分析儀技術指標中都規定紫外線波長為254nm和365nm(或者其他紫外波長)。紫外分析儀主要應用于熒光物質的檢測,通過查閱相關熒光物質測量的國家標準,都規定了使用設備和波長,波長的偏差直接影響結果的判定。因此波長應作為一個重要的指標校準。
2、紫外燈強度隨使用時間的增加而衰減,而紫外輻射照度值的衰減決定了用戶是否需要更換燈,因此此項校準十分必要。
3、燈的穩定性作為一個重要的技術指標直接影響到用戶對樣品的檢測結果,因此,燈的穩定性測量應作為校準項目。 |
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